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【細(xì)胞簡介】

3T3-L1是從小鼠胚胎中分離出來的成纖維細(xì)胞，當(dāng)3T3-L1細(xì)胞從快速分裂到長滿接觸抑制時(shí)，該細(xì)胞經(jīng)過前脂肪向脂肪樣逆轉(zhuǎn)，該細(xì)胞可用于研究糖尿病、肥胖癥等疾病。 

【細(xì)胞特點(diǎn)】

【細(xì)胞培養(yǎng)建議】

l 該細(xì)胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培養(yǎng)基中生長良好，大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3（3.7g/L），若使用DMEM（3.7g/L NaHCO3）培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提高CO2濃度（7%-10%），森貝伽推薦使用1640培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)效果更好。

l 該細(xì)胞起始接種密度應(yīng)在3000/c㎡ ，并且在細(xì)胞達(dá)到80%融合或者密度介于5萬-6萬/c㎡ 時(shí)傳代，避免細(xì)胞完全融合。

l 3T3-L1這樣具有脂滴的細(xì)胞培養(yǎng)過程中受到壓力的表現(xiàn)出現(xiàn)空泡現(xiàn)象時(shí)正常的，原因可能是培養(yǎng)基中缺乏谷氨酰胺、添加了抗真菌劑、CO2濃度較低對培養(yǎng)基中碳酸氫鈉的影響或者使用的血清品質(zhì)較低培養(yǎng)基的營養(yǎng)消耗殆盡。

l 培養(yǎng)密度一般控制在40-80%的匯合度，過高的匯合度，細(xì)胞可能會開始分化。

【細(xì)胞常見問題】

? 3T3-L1細(xì)胞在分化過程中出現(xiàn)異常怎么辦？

   答：細(xì)胞密度是影響3T3-L1細(xì)胞分化的重要因素，過低或過高的細(xì)胞密度都會影響分化效果；密度一般控制在40-80%的匯合度，如果太低，則會影響細(xì)胞生長，如果太高，則會導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

? 3T3-L1細(xì)胞傳代后容易出現(xiàn)細(xì)胞老化的情況怎么辦？

   答：在進(jìn)行傳代時(shí)，需要注意細(xì)胞的消化過程，該細(xì)胞對胰酶比較敏感，添加胰酶后約1-2分鐘內(nèi)細(xì)胞會脫落，因此消化時(shí)間的把控極其重要，同時(shí)避免過度打碎細(xì)胞團(tuán)，以保證細(xì)胞的生長和分化能力。