BC-CE-005 |
胰酶-EDTA消化液(0.25%胰酶, 含酚紅) |
規(guī)格 |
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【貨號(hào)】 BC-CE-005
【規(guī)格】 10mL / 100mL / 500mL
【保存】 -20℃,12個(gè)月。
【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
本產(chǎn)品含0.25%胰酶、0.02%EDTA和酚紅,經(jīng)過(guò)濾除菌,可直接用于細(xì)胞及組織的消化。
【特別說(shuō)明】
1、胰酶-EDTA消化液(0.05%胰酶)因含有EDTA,消化能力明顯強(qiáng)于胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶)。
2、對(duì)于酚紅可能會(huì)干擾后續(xù)的測(cè)試分析,推薦選擇不含酚紅的胰酶-EDTA消化液(0.05%胰酶)和胰酶細(xì)胞消化液 (0.05%胰酶, 不含EDTA)。
3、對(duì)于EDTA可能會(huì)干擾后續(xù)的測(cè)試分析時(shí),推薦選擇不含EDTA的胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶,不含EDTA)和胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅,不含EDTA)。
4、對(duì)于胰酶特別敏感的細(xì)胞,即對(duì)于消化時(shí)間特別快、消化時(shí)間比較難控制的情況,推薦選擇胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶)或胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅)。
【使用方法】
一、貼壁細(xì)胞的消化
(一)吸去培養(yǎng)液,用無(wú)菌的 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,去除殘余的血清。
(二)加入少量胰蛋白酶-EDTA 消化液,蓋過(guò)細(xì)胞即可,37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱放置 1~2 分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同,對(duì)于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間。
(三)顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)。此時(shí)吸除消化液。加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
(四)如果發(fā)現(xiàn)消化不足,可加入胰酶-EDTA 消化液重新消化。
(五)如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及時(shí)吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1 分鐘,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
二、組織的消化
(一)不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
【注意事項(xiàng)】
1、由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同,實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)依據(jù)具體情況,確定最佳消化時(shí)間;消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)狀況。
2、本產(chǎn)品需注意無(wú)菌操作,避免消化液被微生物污染。
3、不宜 4℃長(zhǎng)期保存,切忌反復(fù)凍融,小量使用時(shí)建議分裝凍存。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。