BC-CL02 |
BC Trans-DNA |
規(guī)格 | 1mL/1.5mL |
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【貨號】 BC-CL02
【規(guī)格】 1ml/1.5ml
【保存】 2-8℃,12個月
【類型】 陽離子聚合物
【產(chǎn)品介紹】
BC Trans-DNA是一款性能優(yōu)良的DNA轉(zhuǎn)染試劑,可用于質(zhì)粒DNA的傳送。它具有較強的DNA轉(zhuǎn)染能力,具有不受血清影響、毒性低、穩(wěn)定性好、轉(zhuǎn)染簡單易行、重復(fù)性好等優(yōu)點。
【應(yīng)用范圍】
BC Trans-DNA轉(zhuǎn)染試劑可適用于眾多易轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的DNA轉(zhuǎn)染、瞬時轉(zhuǎn)染及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。適用于多種貼壁細(xì)胞系,特別適用于各種常規(guī)細(xì)胞如HeLa、293T、COS7、CHO和B16F10等,均可得到較高的轉(zhuǎn)染效率,且重復(fù)性好。
【質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染步驟】
請確保所有操作都在無菌條件下進(jìn)行,并遵循實驗室的安全規(guī)范。
以24孔板為例,請參考表1的轉(zhuǎn)染規(guī)模調(diào)整,步驟如下:
1. 細(xì)胞接種: 每孔接種0.5~1.0×105個細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)12~24小時,使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度達(dá)到60~70%融合度
2. 質(zhì)粒稀釋: 將0.4μg質(zhì)粒稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中,終體積10μL
3. 復(fù)合物制備: 按比例取適量BC Trans-DNA稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中, 終體積10μL,室溫孵育5分鐘后與質(zhì)粒稀釋液混勻
4. 室溫靜置20分鐘
5. 每孔20μL 復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)板中,混勻,37℃培養(yǎng)18~48小時后檢測基因表達(dá),無需更換培養(yǎng)基
【質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染優(yōu)化】
可通過改變細(xì)胞密度、 DNA濃度以及BC Trans-DNA濃度對轉(zhuǎn)染進(jìn)行優(yōu)化。保證細(xì)胞融合度在60%以上,BC Trans-DNA (μL):DNA (μg)可以在1:1和5:1之間調(diào)整。
表1. 不同培養(yǎng)板所需轉(zhuǎn)染試劑和DNA的用量